卸妝油皮膚刺激性斑貼試驗技術規範：從動（dòng）物模型到人體評價的全流（liú）程風險評估

卸妝油皮膚刺激（jī）性斑貼試驗技術規範：從動物模型到人體評價的全流程風險評估

一、試驗設計與受試物製備

（一）受試物濃度與對照組設置

受試物處理：

1.原液（yè）組：未稀釋卸妝（zhuāng）油（含油脂、表麵活性劑及防腐劑）；

2.稀釋組（zǔ）：50%卸妝油（去離（lí）子（zǐ）水按1:1體積比（bǐ）稀釋），評估濃度依賴性刺激；

3.陽性對照：0.5%十二烷基硫酸鈉（SDS）水溶液（已知中度刺激）；

4.陰（yīn）性對照（zhào）：去離子水（無刺激性）12。

賦形劑與貼片選擇：

1.貼片類型：無（wú）紡（fǎng）布（bù）圓形貼片（直徑8 mm，麵積0.5 cm²），每片負載0.2 mL受試物；

2.固定方式：低致敏醫用膠帶（3M Micropore），避免膠帶直接（jiē）接觸皮膚引發刺激；

3.封閉性：使用鋁箔覆蓋貼片（封閉式斑貼），確保受試物（wù）與（yǔ）皮膚充分接觸3。

（二）動（dòng）物模型（xíng）與人體誌（zhì）願者選擇

動物（wù）模型：

1.物種：新西蘭白兔（雌性（xìng），體重2.0-2.5 kg），每組3隻；

2.皮膚準備：背部脫毛（麵積5 cm×10 cm），脫毛後24小時檢查皮膚完整性（無劃痕、紅斑）；

3.適應期：實驗室環境適應5天（溫度23±2℃，濕度50±10%）4。

1.納入標準：18-65歲健康成人，皮膚類型Ⅰ-Ⅳ型（Fitzpatrick分類），近3個月未使（shǐ）用糖皮質激素；

2.排除標準：敏（mǐn）感肌、特應（yīng）性皮炎史、妊娠（shēn）哺乳（rǔ）期女性，樣本量≥20人（滿足統計（jì）學要求（qiú））5。

二（èr）、標準操作流程與（yǔ）觀察（chá）指標（biāo）

（一）動物斑貼試驗（yàn）步驟

貼片施加：

1.每隻兔背部對稱放（fàng）置4個貼片（piàn）（原液、稀釋液、陽性對照、陰（yīn）性對照），間距≥2 cm；

2.輕壓貼片確保無氣（qì）泡，使用彈性繃帶固定，防止動物抓撓。

暴露與移除：

1.暴（bào）露時間：24小時；

2.移除後處理：用溫水輕柔清洗殘留受試物，避免摩（mó）擦刺激；

3.觀察（chá）時間點：移（yí）除後30分鍾（急性反應）、24小時（shí）、48小時、72小時（延遲反應）2。

（二）Draize評分體係

反應類型評分（fèn）標準（zhǔn）（動（dòng）物模型）評（píng）分標準（人體模型）

紅斑無（0）、輕（qīng）微可見（1）、中度（2）、重度（3）、焦痂（4）無（0）、輕微（1）、明顯（2）、重度（3）

水腫無（0）、輕微（1）、中度（2）、重度（3）無（0）、輕微（1）、明顯（2）、重度（3）

總分紅斑分+水腫分（最高7分）原發性刺激指數（PSI）=（紅斑發生率+水（shuǐ）腫發生率）/2

（三）人體斑貼特殊觀察指標

1.主觀症狀：瘙癢、灼（zhuó）熱感（視覺模擬評分法VAS 0-10分）；

2.皮（pí）膚（fū）反應持續時間：記錄紅斑/水腫消退時間，超過72小時提示潛在慢性刺激；

3.重複激發試驗：對弱陽（yáng）性結果（PSI 0.5-1.9）者，2周後再次貼片確（què）認反應重現性（xìng）5。

三、結果判定與風險分級（jí）

（一）刺激強（qiáng）度分級標準

動物試驗總分（Draize）人體PSI值刺激強（qiáng）度風險（xiǎn）等級

0-0.4＜0.5無刺激低風險

0.5-1.90.5-1.9輕度刺激中風險

2.0-4.92.0-3.9中度刺激高風險

≥5.0≥4.0重度刺激ji高（gāo）風險

（二（èr））體外替代試驗驗（yàn）證

EpiDerm™重組人表皮模型（xíng）：

1.操作步驟：受試物暴露15分鍾→PBS清洗→MTT染色→檢測570 nm吸光度；

2.判定標（biāo）準：相對細胞（bāo）活力≥50%為（wéi）無刺激，與動物試驗結果（guǒ）一致性85%6。

3D皮膚模型優勢：

無（wú）需動物倫理審批，試驗周期縮短（duǎn）至48小時，可評（píng）估香精、防腐劑等成分的協同刺激作用7。

四、影響因素與試驗優（yōu）化

（一（yī））關鍵影響因素

1.皮膚完整性：動（dòng）物（wù）脫毛（máo）時避（bì）免刮傷（可采用化學脫毛（máo）劑硫化鈉，濃度8%）；

2.貼片停留時間：人體模型48小時暴露比（bǐ）24小（xiǎo）時（shí）更易檢出延遲性刺激（如甲醛釋放體）；

3.環境濕度：高濕度（＞60%）可能增強水溶性成分的滲透，建議控製在50±5%3。

（二）配方優化建（jiàn）議

刺激性成分替（tì）代：用（yòng）苯氧乙醇（≤1%）替代甲基異噻唑啉酮，降低防腐劑刺激風險；

油脂體係調整：增加霍霍巴（bā）油（20%-30%）可緩解表麵活（huó）性劑對皮膚屏障的破壞；

pH值控製：調節至5.5-7.0（接（jiē）近皮膚pH），減少酸堿刺激1。

五（wǔ）、法（fǎ）規要求（qiú）與報告撰寫

（一）法規依據

中國：《化妝品安全技術規範》（2022年版）第四章皮膚刺激性/腐蝕性試驗；

歐盟：EC 1223/2009法規，要求對新原料進行體外替代試驗；

美國：FDA化妝品自願注冊（cè）計劃（VCRP）

（二）報告核（hé）心內容

1.受試物信息（成分、濃度、批號）；

2.試驗（yàn）設計（模型選擇、樣本量、對照組）；

3.原始數據（紅斑/水腫照片、評分記錄）；

4.結論與建議（如“本品為輕度刺激，建議添加舒緩成分"）。

關鍵詞：卸妝油；皮膚刺激性；斑貼試驗；Draize評分；重組人表皮模型

參考文（wén）獻

[1] 《化妝品安全（quán）技（jì）術規範》（2022年版）[S]. 國家（jiā）藥監局.

[2] OECD Test No. 404 皮膚刺激性/腐蝕性試驗[S]. 2015.

[3] SCCS Guidance on Dermal Irritation Testing[S]. 2021.