體外抗菌試驗-殺（shā）菌檢測報告-17.c18起草视频檢測

抗菌試驗是通過（guò）模擬實際使（shǐ）用條件，對材料進行抗菌（jun1）處理，並觀察細菌在處理前後的數量變化，以此來（lái）評（píng）估材（cái）料的抗菌（jun1）效（xiào）果。抗（kàng）菌（jun1）試驗可分為體外（wài）抗菌試驗和體內抗菌實驗，下麵跟著17.c18起草视频檢測小（xiǎo）編一（yī）起來看下體外抗菌試驗。

體外抗菌試驗-殺菌檢測報告-中（zhōng）科檢測

體外抗菌實驗方法

1、OD值（zhí）測試(適合無顏色幹擾、可溶性樣品);

2、抑菌圈（quān）測試(適合活性成分可以溶出的樣品);

3、振蕩培養+平板塗布計數法(可用於不溶性樣品抗菌活性評價);

4、MIC測試(適合已驗證過具有抗菌活性且無顏色幹擾的可溶性樣品);

5、MBC測試(適合已檢測過具有最小抑菌濃度的樣品);

如果之前沒有做過（guò）抗菌實驗，建議先做簡單的抑菌（jun1）圈或者（zhě）OD值評估（gū）下抗菌效果（guǒ）。

體外抗菌實驗樣品要求

1、抑菌圈測試

1.1塊體類-薄膜、布料、金屬塊、紙片、凝膠等

送樣量：至（zhì）少3個/種菌。

製樣要求（qiú）：金屬塊、凝膠類樣本須製備成統（tǒng）一大小的（de）圓形/方形，建議製備直徑為6-10 mm圓形。布料、紙片類樣本可代為（wéi）裁剪，默認製備直徑（jìng）為6 mm。

注（zhù）：凝膠（jiāo）樣本須保證樣本在（zài）培養條件下(一般為（wéi）37℃)不融化。

1.2液體類

送樣量：根（gēn）據測試時（shí）樣（yàng）本濃（nóng）度而定

①若采用原液測試，則樣本量為（wéi）1 mL/種菌;

②若采用（yòng）稀（xī）釋後樣本測試，則須告知稀釋倍數及稀釋液，樣本量為1 mL/稀釋倍數（shù）/種菌。

1.3粉末類（lèi）

送樣量：因不（bú）同樣本密度不同，無法保證每個（gè）加樣孔均能加入等量樣本，故（gù）建議樣本做分（fèn）散液，按照等體積加樣(每個孔最大（dà）加樣量為0.2 mL)，能提升樣本量的一致性。需要提供質量/體積比(選擇合適的樣本分散（sàn）液（yè）)，樣本量為質量/體積×1 mL/種菌。

如果不可使用（yòng）分散液，需要預試，樣本（běn）量可聯係本公（gōng）司人員確（què）認（rèn）。

2、OD值測試

2.1塊體（tǐ）類-薄膜、布料、金屬塊（kuài）、紙片、凝膠（jiāo）等

送樣量：需要提供樣本與菌液的（de）培養體係。比如X g樣本/mL菌液，樣本量為4X g/種菌。

2.2液體（tǐ）類(要求樣本溶液無色或者淡色（sè）)

送樣量：根據測（cè）試時（shí）樣（yàng）本的溶劑和（hé）濃度而定

①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇（chún）、DMF等)，推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度，樣本量為0.1 mL/種菌。

舉例：測試材料的（de）溶劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣（yàng）本為100 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/種菌。

②若溶劑不具備（bèi）殺菌性(如PBS、純水、生理鹽（yán）水（shuǐ）等)，推薦提供樣本（běn）濃（nóng）度為10倍測試濃度，樣（yàng）本（běn）量為0.4 mL/種（zhǒng）菌（jun1）。

舉例：測試材料的溶劑為（wéi）純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.4 mL/種菌。

注：如果提供樣本原（yuán）液濃度高於推薦濃（nóng）度，可按比例計算樣本量。

2.3粉末類（lèi）

送樣量：需要提供樣本與菌液的培養體係。比如X g樣本/mL菌液（yè），樣本量（liàng）為（wéi）4X g/種菌。

3、平板塗（tú）布計（jì）數測試

3.1塊體（tǐ）類-薄膜、金屬塊（kuài）、鍍膜玻璃等(具備一定的表麵（miàn）積)

測試方法參考國標GBT 31402-2015 塑料 塑料表麵抗菌性能試驗方法、JCT 1054-2007 鍍膜抗菌玻璃。

送樣量：樣（yàng）本量為1個/次重複/種菌

樣（yàng）本尺（chǐ）寸：標準尺寸大小5×5cm，建議最小尺寸1×1cm

3.2液體類

送（sòng）樣量：根據測試時樣本的溶劑和濃度而定

①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦提供樣（yàng）本濃度為50倍測（cè）試濃度（dù），樣本量為0.03 mL/次重複/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣（yàng）本為100 mg/mL濃度的樣本0.03 mL/次重複/種菌。

②若溶劑（jì）不具備殺菌性(如PBS、純水、生理（lǐ）鹽水等)，推薦提供樣本（běn）濃度為10倍測試濃度，樣本量為0.1 mL/次重複/種菌。

舉（jǔ）例（lì）：測試材（cái）料的溶劑為純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度（dù）的樣本0.1 mL/次（cì）重複/種菌。

3.3粉末（mò）類

送樣量：需要提供（gòng）樣本與菌（jun1）液的培養體係。比如X g樣（yàng）本/mL菌液，樣本量為X g/次重複（fù）/種菌。

4、MIC/MBC測試

4.1粉末/液體類（lèi）(要求樣本溶（róng）液（yè），溶解且無（wú）色或者淡色)-微孔板法

送樣量：根據測試時樣本的溶劑和初始工作濃度而定

①若（ruò）溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦（jiàn）提（tí）供樣本濃度為50倍測試（shì）濃度，樣本量為0.03 mL/種菌。

舉（jǔ）例：測試材料的溶劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供（gòng）樣本為100 mg/mL濃度的樣本（běn）0.03 mL/種菌。

②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生（shēng）理鹽水等)，推薦提供樣本濃度為10倍測試濃（nóng）度，樣本量為0.1 mL/種菌。

舉例：測試材料的溶（róng）劑為純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/種（zhǒng）菌。

注：如果提供樣本原液濃度高於推薦濃度，可按比例計（jì）算樣本量。

如果樣本為粉末，可按照濃度（dù）和所需體積計算樣本量(<10 mg者，需稱量並標記清楚（chǔ），避免（miǎn）樣本量較少情（qíng）況下再反複稱量造成損耗)。

4.2粉末/液體類(樣本顏色較重)-平板法（fǎ）

送樣量：根據測試時樣（yàng）本工作濃度和濃（nóng）度個數而（ér）定。比如（rú）工作濃度為X g/mL(或?M)，測試n個濃度，樣本（běn）量（liàng）為60X*n g(或10X ?M的液體樣本6*n mL)

4.3液體類(樣本屬於分散液或製備成（chéng）分散液，且呈無色或者淡色（sè）)-試管法

送樣量：根據（jù）測（cè）試（shì）時樣本工作濃度（dù）而定

①若分散劑具備（bèi）殺菌（jun1）性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度，樣本量為2 mL/種菌。

舉例：測試材料的分散劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則（zé）需提供樣本為100 mg/mL濃度（dù）的樣本（běn）2 mL/種菌（jun1）。

②若分散劑不（bú）具備殺菌性（xìng）(如PBS、純水（shuǐ）、生理鹽水（shuǐ）等)，推薦（jiàn）提供樣本濃度為10倍（bèi）測試（shì）濃度，樣本量為10 mL/種（zhǒng）菌。

舉（jǔ）例：測試材料的分散劑為純水，測（cè）試（shì）濃（nóng）度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本（běn）10 mL/種（zhǒng）菌。

4.4粉末（mò）類(直接加樣)-試（shì）管法

送樣量：根（gēn）據測（cè）試時樣本的工作濃度而定。比如工作濃度為X mg/mL(g/mL)，則（zé）樣品量為30X mg(g)/種菌。

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