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病(bìng)毒保存液適用於病毒、流感病毒、手足(zú)口病毒等(děng)常見病毒(dú)樣本采集保存運輸工作,是采(cǎi)樣(yàng)管內浸末采樣拭子病毒樣本一種保護病毒(dú)的被檢測物質的液體,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本,儲存的(de)樣本可用於後續的核酸提(tí)取或純化等臨床實驗,病(bìng)毒保存液分類 病(bìng)毒滅活測試(shì)方法。
病毒保(bǎo)存液分類(lèi) 病(bìng)毒滅活測試方法
病毒保存液(yè)分為兩(liǎng)種:滅活型和非滅(miè)活型(xíng)。
滅活型的病毒保存液(yè)主要是核酸提取裂解液(yè)改良的病毒裂解型保存液,裏麵添(tiān)加有高濃度(dù)的裂解鹽,能夠迅速高效地使待(dài)測樣本裏的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止(zhǐ)感染(rǎn),同時又含有Rnase酶抑製(zhì)劑,能保護病毒核酸(suān)不被(bèi)降解,後續的NT-PCR實驗隻要能檢測出病毒的核酸既可以做(zuò)出診斷。而且能在常溫下保存相對較長的(de)時間。
非滅活型保存液主要是以運送培養(yǎng)基為基礎改良的病毒維持液型保存液。它可(kě)以同時保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒(dú)核酸DNA或(huò)者是RNA,這樣病毒在體外具有(yǒu)蛋白抗原表位和(hé)核酸的完整性,當然操作失誤時也有一定的感染性風險。采樣後(hòu)長時間保存需要保持嚴格低溫。
不管(guǎn)是何種病毒保存液,我們在采樣過後都要盡(jìn)快檢測或者嚴格低(dī)溫保存,保證檢測做到準確(què)無誤。病毒的繁(fán)殖(zhí)與變異速度較快,要維(wéi)持病毒樣本的穩定性,病毒保存液起到至(zhì)關重要的作用。


病(bìng)毒(dú)保存液病毒滅活測試方法(fǎ)
1、病毒保存液檢測對象
毒株:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
細胞:MDCK細胞
2、病毒保存液檢測步驟:
1)取樣品病毒保存液(非滅活型) 9.8mL,加(jiā)入0.2mL病毒原液混勻,分裝若幹測試液(yè),存(cún)至要求溫度;
2)保存至對應天數後取出測試液,檢測病毒滴度;
a)10倍倍比稀釋測試液;
b)將稀(xī)釋液加入含生(shēng)長至(zhì)單層的MDCK細胞的96孔細胞培養板(bǎn)上,並設置正常對照組,加等量培養液;
c)置於(yú)35'C、5%CO2的培養箱中孵育60 min後棄去上清液,加入雙(shuāng)抗400 IU/mL的維持培養液繼續孵育3~5天,每天觀察細胞增長狀況;
d)當接種(zhǒng)病毒(dú)的MDCK細胞出現變圓或縮小等病變現象時,記錄產生細胞(bāo)病(bìng)變的情況;
e)根據Reed-Muench公式計算半數感染量TCID50。
17.c18起草视频檢測作為專業的第三方檢測機構,開展病毒采集管檢測,病毒保存液病毒滅活測試,報告內容主要包含試驗毒株、實驗批次(cì)、保存溫度、保存天(tiān)數、病毒滴度、病毒活性及病毒滅活率等檢測數據,具體費用及周(zhōu)期可以(yǐ)谘詢17.c18起草视频檢測工程師了(le)解。
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